产品货号:
YT482
中文名称:
N端Myc标签融合蛋白质粒
英文名称:
N-Myc plasmid(with CMV promoter)
产品规格:
1μg|100μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本质粒用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag (Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
组分 | 1μg | 100μg |
pCMV-N-Myc | 1μg | 1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1–602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620–639 |
Myc tag | 679–708 |
multiple cloning site | 711–784 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 827–848 |
SV40 polyA signal | 860–1243 |
f1 origin of ss-DNA replication | 1381–1687 |
bla promoter | 1712–1836 |
SV40 promoter | 1856–2194 |
neomycin/kanamycin resistance ORF | 2229–3020 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3021–3479 |
pUC origin | 3608–4275 |
- pCMV-N-Myc中没有的酶切位点包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I Spl I Xca I - pCMV-N-Myc中的单酶切位点包括:
Nde I CA`TA,TG 241 Apa I G,GGCC`C 783 SnaB I TAC|GTA 347 Pvu I CG,AT`CG 861 Nhe I G`CTAG,C 598 Bcl I T`GATC,A 1015 Sac I G,AGCT`C 656 Mun I C`AATT,G 1108 Sac II CC,GC`GG 663 Hpa I GTT|AAC 1121 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Mlu I A`CGCG,T 1244 Not I GC`GGCC,GC 669 Dra III CAC,NNN`GTG 1474 Ear I CTCTTC 7/10 693 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2133 PspA I C`CCGG,G 712 BseR I GAGGAG 16/14 2176 Xma I C`CCGG,G 712 Stu I AGG|CCT 2179 Srf I GCCC|GGGC 714 Cla I AT`CG,AT 2198 Sma I CCC|GGG 714 Kas I G`GCGC,C 2357 BamH I G`GATC,C 719 Nar I GG`CG,CC 2358 Hind III A`AGCT,T 725 Ehe I GGC|GCC 2359 Pst I C,TGCA`G 735 Bbe I G,GCGC`C 2361 EcoR I G`AATT,C 737 Msc I TGG|CCA 2440 EcoR V GAT|ATC 745 Tth111 I GACN`N,NGTC 2476 Sal I G`TCGA,C 749 BsrD I GCAATG,8 2591 Acc I GT`MK,AC 750 Bsp1286 I G,DGCH`C 2661 Bgl II A`GATC,T 755 Rsr II CG`GWC,CG 2874 PaeR7 I C`TCGA,G 761 BsiC I TT`CG,AA 3040 Xho I C`TCGA,G 761 BstB I TT`CG,AA 3040 Xba I T`CTAG,A 767 Bsa I GGTCTC 7/11 3347 Spe I A`CTAG,T 773 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3687 Bsp120 I G`GGCC,C 779 ApaL I G`TGCA,C 3962
pCMV-N-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639):5' AATTAACCCTCACTAAAGGG 3'
T7 primer(827-848):5' GTAATACGACTCACTATAGGGC 3'
- 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pCMV-N-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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